梅花鹿Thymosin beta10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

• 作者: 张伟 李春义 王大涛 褚文辉 赵海平
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 梅花鹿 Thymosin beta 10 原核表达 鹿茸 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 页码范围: 72-79
• 页数: 8页
• 分类号: S825
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.11.07

摘要

为研究梅花鹿Th ymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备.结果表明:1)获得了190 bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10.2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3 mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50 mg/mL.3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白.4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖.综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李春义		54	144	6.0	9.0