荷斯坦牛脊椎畸形综合征TaqMan荧光PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 刘中勇 刘志玲 吴晓薇 康伟 朱道中 郭霄峰 陈增荣
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 荷斯坦牛 脊椎畸形综合征 TaqMan荧光PCR
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: S823.3
• 字数: 3118字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2015.05.005

摘要

[目的]建立快速筛查牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)基因携带者的方法,在牛群中逐渐淘汰CVM基因携带者以减少养牛业损失.[方法]根据GenBank已发表的CVM基因的SLC35A3基因序列,设计合成了2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立了牛脊椎畸形综合征TaqMan探针检测方法.对方法的特异性和敏感性进行分析后,应用该方法对临床样本进行检测,并与测序方法进行比较.[结果和结论]该方法能有效区分突变型、野生型和杂合型个体.各种基因型的检测灵敏度为:突变型质粒拷贝数1×103 μL-1,杂合型质粒拷贝数1×104 μL-1,野生型质粒拷贝数5×103 μL-1.从292份荷斯坦牛全血中检出6份CVM基因携带者,与测序方法结果一致.本研究建立的方法简便快捷、准确率高,适合大样本筛选和口岸现场快速筛查.