禽网状内皮组织增殖病病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及其识别区分析

• 作者: 孙明铭 曹红 李晓齐 王永强 郑世军
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 禽网状内皮组织增殖病病毒 gp90蛋白 单克隆抗体 亲和力 抗原表位
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 动物及兽医生物技术
• 页码范围: 75-85
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.140225

摘要

为了制备禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) gp90蛋白的单克隆抗体,应用His-gp90融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过筛选、3次亚克隆后获得3株稳定分泌抗REV-gp90蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为3G5-B8、3G5-A10和1G12.经间接ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)方法检测,单克隆抗体的亲和力解离常数(Kd)分别为6.483×10-10、4.844× 10-10和9.330×10-10,3株单抗的亚型分别为IgGl,IgG1和IgG2b.经Western blotting和间接免疫荧光实验检测,3株单抗均能识别REV感染DF-1细胞后产生的gp90蛋白.以Western blotting方法利用单抗检测不同截短的gp90蛋白,初步确定3G5-B8和3G5-A102株单抗抗原识别区均位于gp90蛋白第200-245位氨基酸,而1G12株单抗识别区包含第230-235位氨基酸.这些单抗为REV的诊断和致病机理研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永强	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	25	52	4.0	7.0
2	郑世军	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	29	97	6.0	9.0
3	曹红	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	26	117	7.0	10.0
4	李晓齐	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	17	19	3.0	3.0
5	孙明铭	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	2	11	2.0	2.0