猪Mx1和牛Mx1蛋白在PK-15细胞中的表达及其对伪狂犬病病毒的抑制

• 作者: 刘明秋 王鹏 郑兆鑫
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪Mx1 牛Mx1 PK-15细胞 伪狂犬病病毒
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20150301

摘要

目的:研究猪Mx1和牛Mx1蛋白在PK-15细胞中的表达并检测其是否对伪狂犬病病毒(PRV)具有抑制作用.方法:从IBRS-2细胞和MDBK细胞中分别调取猪Mx1和牛Mx1基因,并克隆到pcDNA3.1/myc-His(-)B,构建得到真核重组表达质粒,以脂质体转染的方法将其分别导入到PK-15细胞,从mRNA水平和蛋白质水平鉴定重组质粒在细胞内的表达情况,然后用细胞毒性试剂盒检测这两种蛋白是否对PK-15细胞具有毒性.之后,通过荧光定量PCR检测猪Mx1和牛Mx1在攻毒后不同时间、不同攻毒剂量的条件下对PRV的抑制情况,并观察100TCID5o病毒攻击细胞72h后的病变程度.结果:成功克隆了猪Mx1和牛Mx1基因,经mRNA水平和蛋白质水平证实,两种重组质粒在PK-15细胞内能够正常表达.从荧光定量PCR和细胞病变的角度来看,细胞内表达的Mx1蛋白对PRV具有显著性的抑制(P ＜0.001).结论:猪Mx1和牛Mx1基因在PK-15细胞中表达的Mx1蛋白能够抑制PRV在胞内的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鹏	复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心	64	321	10.0	15.0
2	郑兆鑫	复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心	29	280	10.0	16.0
3	刘明秋	复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心	22	197	6.0	14.0