一种新的混合斑精子分离方法

• 作者: 伍贤军 李晓萌 杨百全 王冰瑜 缪璇 赵兵 钱程
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 混合斑 受精素β蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 分析化学
• 页码范围: 886-892
• 页数: 7页
• 分类号: O657
• 字数: 4751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20140965

摘要

制备了精子表面膜抗原受精素β蛋白(Fertilinβ3)的特异性抗体,通过抗原-抗体反应和抗体固相偶联技术,将抗体连接到琼脂糖球珠上,建立了混合斑精子分离纯化的新方法.首先,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增编码人受精素β蛋白第341～ 373位氨基酸的基因序列,构建PGEX-4T-1/Fertilinβ原核表达质粒;其次,诱导表达GST-Fertilinβ融合蛋白,制备受精素β蛋白多克隆抗体,免疫荧光检测结果表明,受精素β蛋白定位于精子的头后部,并且阴道上皮细胞没有受精素β蛋白的表达;最后,将受精素β抗体与ProteinA琼脂糖球珠连接构建固相抗体系统,将精子吸附于表面,可从混合斑(精子与阴道上皮细胞混合液)中分离纯化精子.本文为性犯罪案件侦破提供了新的方法.