利用CRISPR/Cas9技术构建CreERT2定点敲入Isl1基因小鼠模型及分析

• 作者: 周云鹤 杨桦 费俭 顾晓雯 黄丹丹
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: CRISPR/Cas9 心肌祖细胞 Isl1基因 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1406-1413
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2015.10.0184

摘要

心肌祖细胞增殖和分化是心脏损伤后修复再生的基础,而Isl1被认为是心肌祖细胞的特异性标志.为了研究以及示踪Isl1+心肌祖细胞及其分化后代,该文尝试利用成簇规律间隔短回文重复序列CRISPR/Cas9系统,将CreERT2定点插入到小鼠Isl1内源基因启动子之后,建立了CreERT2基因敲入小鼠模型.通过与Rosa26-loxP-neo-loxP-lacZ小鼠(Rosa26-lacZ+)交配,获得Isl1-CreERT(KI)/Rosa26-lacZ+双杂合小鼠.经过基因型鉴定、组织表达谱测定和X-gal染色、冰冻切片和石蜡切片等方法,确认基因敲入小鼠的CreERT2表达在成年小鼠心脏窦房结、心脏神经节、主动脉弓和肺动脉根部,与文献报道的Isl1表达部位相同.该研究建立的模型可为研究心肌祖细胞的增殖扣谱系示踪提供重要的模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周云鹤		13	29	4.0	4.0
2	费俭		17	71	4.0	8.0
3	杨桦		12	443	6.0	12.0
4	顾晓雯		2	0	0.0	0.0
5	黄丹丹		2	2	1.0	1.0