家蝇Hsp20.6基因原核表达及其在高温胁迫下的表达分析

• 作者: 刘红美 张洁 李显航
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 小热休克蛋白 原核表达 热激 表达分析
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 855-859
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20150180

摘要

目的 对家蝇小热休克蛋白Hsp20.6基因进行原核表达,并研究高温胁迫下该基因在家蝇各生长发育阶段及成虫不同部位的表达变化情况,为最终阐明其生物学功能奠定基础.方法 利用pET28a(+)原核表达载体构建家蝇Hsp20.6基因的重组表达载体,酶切、测序鉴定后,诱导蛋白的表达.采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR研究Hsp20.6在家蝇卵、3日龄幼虫、蛹、成虫4个生长发育阶段及成虫头部、胸部、腹部的表达情况.结果 成功构建pET28a (+)-Hsp20.6重组表达载体,IPTG诱导表达产物大小约为Mr 21 000,与生物信息学预测结果相符.RT-PCR与实时荧光定量PCR表明Hsp20.6基因大在家蝇各个发育时期和成虫各部位有不同程度的表达,热激能上调该基因的表达(P＜ 0.05),以幼虫和成虫头部组织上调量最高.结论 Hsp20.6基因属于热诱导型基因,参与了家蝇适应热胁迫的调控,可能在其中具有某种重要功能.