C2株蓝氏贾第鞭毛虫 SU MO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达

• 作者: 刘晓莉 周英斌 李少东 李思瑾 王洋 田喜凤 禇晗
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫 SUMO特异性蛋白酶 原核表达 生物信息学
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 203-207
• 页数: 5页
• 分类号: R382.21
• 字数: 4285字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.03.003

摘要

目的：克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ，简称贾第虫）的SUMO‐Specific Protease（SENP）基因，并对其序列进行生物信息学分析，原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法提取C2株贾第虫基因组DNA ，以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段，连入克隆载体pGM‐T ，测序后进行生物信息学分析；根据分析结果克隆SENP的催化活性区，构建其原核表达载体pET‐28a（＋）‐SENPc ，在 E ．coli Rosetta（DE3）中诱导表达，SDS‐PAGE及Western blot观察表达结果。结果成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列，生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同，二级结构以无规则卷曲为主，其催化活性区位于126‐497aa ，被一段插入序列分割成两个部分；构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达，在相对分子量约43 kD的位置出现目的蛋白条带，与理论值相符。结论成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区，为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田喜凤	河北联合大学生命科学学院	39	63	4.0	6.0
2	王洋	河北联合大学生命科学学院	25	62	4.0	6.0
3	李少东	河北联合大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	周英斌	河北联合大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
5	刘晓莉	河北联合大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
6	禇晗	河北联合大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
7	李思瑾	河北联合大学生命科学学院	3	2	1.0	1.0