鸡源志贺菌IpaC基因变构体重组酵母表达载体的构建及初步表达

• 作者: 刘一尘 张彬 张春杰 李克宇 王雪云 蒋大伟 许兰菊 韩志霞 马金玉
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡源志贺菌 IpaC基因 毕赤酵母 表达载体 构建 表达
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1631-1635
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2015.10.12

摘要

为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究首先采用反向PCR将IpaC基因358～360位和361～363位酵母菌低频密码子突变为偏嗜性密码子,并进一步构建了克隆载体pMD18-T-IpaC*和酵母表达载体pPICZαA-IpaC*,然后将线性化重组质粒pPICZaA-IpaC*电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行诱导表达,并用SDS-PAGE检测其表达产物.结果表明SDS-PAGE在大约63 000处检测出目的条带,实现了鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的初步表达.这为进一步研究IpaC生物学功能奠定了基础.