乙型脑炎病毒E结构域蛋白表达、纯化与胶体金的制备

• 作者: 刘敏 梅建华 陈沙彬 雷永良
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 E蛋白 胶体金
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1445-1448
• 页数: 4页
• 分类号: R512.32
• 字数: 2919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2015.012.012

摘要

目的 分离乙脑病毒临床株,制备高纯度E蛋白抗原,制作用于乙脑病毒抗体检测的胶体金快速检测试纸条.方法 PCR扩增乙脑病毒E蛋白基因、使用原核表达系统进行融合表达、Ni-柱亲和纯化,透析复性后多点皮下免疫动物获得兔抗乙脑病毒E蛋白的多克隆抗体,免疫印迹法检测该抗体与重组蛋白结合的特异性.对抗体处理后,制备快速检测乙脑病毒的胶体金试剂. 结果 成功克隆出乙脑病毒E蛋白基因并表达该蛋白,纯化后免疫印迹显示在蛋白分子量53 kDa左右显出1条目的条带(乙脑病毒E蛋白);酶联免疫法检测多克隆抗血清的效价达到1:12 800,与阴性血清不发生特异性反应. 结论 成功对乙脑病毒E蛋白基因进行了克隆表达,制备的胶体金试剂能检测出乙脑患者血清中的抗体,操作简便快速,具有临床推广意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅建华		23	66	5.0	8.0
2	雷永良		84	279	9.0	14.0
3	刘敏		11	15	3.0	3.0
4	陈沙彬		7	2	1.0	1.0