嗜热古细菌Sulfolobus tokodaii脱卤酶在D-乳酸生产中的应用

• 作者: 何文龙 潘东 解桂秋 高仁钧 高贵
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: L-2-卤代酸脱卤酶 2-氯丙酸 乳酸
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 有机化学(Organic Chemistry)
• 页码范围: 698-703
• 页数: 6页
• 分类号: O621.25
• 字数: 5178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20140739

摘要

将来源于嗜热古菌 Sulfolobus tokodaii的脱卤酶( L-HADST )基因克隆到载体 pET28b,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,在蛋白的N末端带有6个组氨酸融合标签,纯化后经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示融合蛋白的分子量约为25000.融合蛋白催化2-氯丙酸(2-CPA)的最适反应温度为70℃,最适pH值为9.5.以外消旋2-CPA为底物生产D-乳酸,利用HPLC检测反应液中2-CPA及乳酸的变化,发现L-HADST只催化L-2-CPA脱氯反应.对酶催化反应条件进行了优化,结果表明,在pH值为9.5,温度为60℃的条件下,当反应体系中缓冲液浓度为3 mol/L,底物浓度为0.5 mol/L,酶浓度为3×104 U/L时有较高的底物转化率及乳酸生成量.依据条件优化结果可知,影响反应速度的因素有底物浓度、缓冲液浓度以及酶浓度,其中底物浓度变化对转换率的影响最明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高仁钧	吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室	11	44	3.0	6.0
2	解桂秋	吉林大学药学院	6	5	1.0	1.0
3	高贵	吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室	28	134	6.0	11.0
4	潘东	吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0
5	何文龙	吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0