Salsolinol合成酶的克隆和表达

• 作者: 冯程程 刘可夫 庆宏 曾凡 邓玉林 陈薛钗
• 来源期刊: 科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: Salsolinol合成酶 定点突变 克隆表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 73-76
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3981/j.issn.1000-7857.2015.08.012

摘要

Salsolinol合成酶是一种催化多巴胺和乙醛生成Salsolinol的酶,与帕金森病发病机制密切相关.研究发现Salsolinol合成酶与泛素的氨基酸序列高度相似,只有4个氨基酸位点有差异.本研究以泛素基因为模板,采用聚合酶链式反应技术对4个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到载体pET30a-GST上,构建pET30a-GST-Sal synthase重组载体,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达融合蛋白,经亲和层析柱纯化.结果表明,实现目的位点的定点突变,获得Sal合成酶基因,成功构建了GST-Sal synthase原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Sal synthase融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓玉林		192	865	13.0	20.0
2	庆宏		36	162	8.0	12.0
3	冯程程		1	0	0.0	0.0
4	陈薛钗		6	77	3.0	6.0
5	刘可夫		2	1	1.0	1.0
6	曾凡		3	0	0.0	0.0