实时定量RT-PCR对乙型肝炎病毒全长RNA(fRNA)的定量检测

• 作者: 姚丽 巩丽 张伟 张佳瑞 朱少君 李艳红 王姝妹 韩秀娟
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: HBV RNA 实时荧光定量 fRNA Hayashi's定量法
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-32
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2015.01.008

摘要

目的:建立一种简便的定量检测慢性乙型肝炎患者血清中终止于聚腺苷酸化位点的乙型肝炎病毒全长RNA(fRNA)的方法.方法:选取53例未治疗的乙型肝炎患者及22例HBsAg阴性的健康者为研究对象,使用锚定oligo-dT的引物对其血清中fRNA进行实时定量反转录PCR检测,统计分析其与HBV DNA、HBcrAg和HBeAg的相关性.结果:对fRNA进行实时荧光定量RT-PCR检测的下线为2.3 log copies/ml,标准曲线的相关系数为0.99(P＜0.0001).53例乙型肝炎患者中,29例(54.7％)可以检测到fRNA,22例正常对照中没有检测到fRNA.27例HBeAg阳性和/或高水平HBV DNA的患者全部检测到fRNA,26例HBeAg阴性并且低水平HBV DNA的乙型肝炎患者中有2例(7.7％)检测到fRNA (P＜0.0001).HBeAg阳性患者血清中fNA水平高于HBeAg阴性患者(5.0±0.3 vs.2.9± 0.4 log copies/ml,P＜0.001).fRNA与HBV DNA/HBcrAg具有显著相关性(闻.905、0.881,P＜0.0001).Hayashi's定量分析法Ⅰ显示fRNA与HBV DNA相关性强于其与HBcrAg的相关性.结论:与HBV DNA和HBeAg一样,fRNA可作为常规检测判断HBV的复制水平并指导用药.