针对单增李斯特菌iap基因PCR检测方法的建立及其应用

• 作者: 于会举 何圆圆 周吉培 崔小辉 王伟杰 蒋丹 贾艳艳
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 单增李斯特菌 英诺克李斯特菌 PCR方法 iap基因 临床应用 食品安全监督
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 160-162,172
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61+7
• 语种: 中文

摘要

为了建立快速、简便的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)PCR检测方法,试验根据GenBank上已发表的单增李斯特菌iap基因序列,设计1对特异性引物,通过优化各种条件建立针对iap基因的单增李斯特菌的PCR检测方法,并对该方法的灵敏度和特异性进行评估及初步临床应用.结果表明:建立的PCR检测方法的最佳退火温度为60℃,Mix最佳使用量为12.5 μL,模板使用量为30 ng;该方法对单增李斯特菌纯培养物的检测限为1×105 cfu/mL,且能够区分单增李斯特菌和英诺克李斯特菌,对沙门氏菌、大肠杆菌及猪链球菌均无交叉反应;对42份疑似感染单增李斯特菌临床样品进行PCR检测,有7份扩增结果呈阳性,与传统分离培养结果一致.说明试验所建立的PCR方法可用于食品中单增李斯特菌的检测.