山羊β-防御素表达载体的构建及产物的活性鉴定

• 作者: 刘桂琼 刘胜敏 姜勋平 康建锋
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 医学
• 关键词: GBD-1 防御素 毕赤酵母 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧·动物医学·蚕蜂
• 页码范围: 40-44
• 分类号: R979.5
• 语种: 中文

摘要

对山羊GBD-1进行载体构建,转到毕赤酵母中高效表达并对表达产物的生物学活性进行鉴定,为进一步研究防御素抗菌机理打下基础.根据GenBank中山羊β-防御素的CDS区序列,设计含有特殊酶切位点的引物扩增到目的片段,将该片段克隆到真核表达载体pPICZαA中,构建重组表达质粒pPICZαA/ GBD-1,电转化到毕赤酵母中进行诱导表达.测序结果表明扩增的目的片段为114bp,编码38个氨基酸,经Tricine-SDS-PAGE电泳验证在4.3 KD处有目的蛋白;作抑菌实验发现,重组蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑菌效果.山羊防御素成功地在毕赤酵母中诱导表达,为进一步研究GBD-1的蛋白纯化以及抗菌机理打下基础,并为利用基因工程方法生产防御素提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜勋平	华中农业大学动物科技学院	71	427	12.0	17.0
2	刘桂琼	华中农业大学动物科技学院	48	173	8.0	11.0
3	刘胜敏	华中农业大学动物科技学院	6	24	3.0	4.0
4	康建锋	华中农业大学动物科技学院	3	9	1.0	3.0