小鼠足细胞Tbxa2r基因敲低方法探讨

• 作者: 丁露露 孔维信 孙怀鑫 张林 邓振兴
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 足细胞 血栓素A2受体基因 小分子RNA干扰技术 基因敲低
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 24-26
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2
• 字数: 2744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.02.008

摘要

目的：设计并筛选对足细胞血栓素A2受体（ Tbxa2r）基因表达敲低效果最佳的siRNA序列。方法培养永生性小鼠足细胞（MPC5），取生长占培养板70％细胞用于实验。设计4条 siRNA 序列（Tbxa2r-mus-1150、Tbxa2r-mus-1309、Tbxa2r-mus-1677、Tbxa2r-mus-1884），经转染效率验证后转染足细胞。将细胞分为四组：干扰组（以筛选出的干扰序列转染细胞）、空白组（正常细胞样品）、模拟组（只加转染试剂的细胞样品）、阴性对照组（转染无序干扰系列的细胞样品）。 Real-time PCR检测各组细胞Tbxa2r基因，Western blot法检测Tbxa2r蛋白。结果筛选出干扰效果最强的siRNA序列Tbxa2r-mus-1677，其转染24 h后对Tbxa2r基因表达干扰效果较小，而在转染48 h后足细胞Tbxa2r基因相对表达量最低。转染72 h后，细胞Tbxa2r蛋白相对表达量明显降低。结论采用Tbxa2r特异性siRNA技术成功敲低足细胞Tbxa2r基因表达，并筛选出敲低效果最佳的siRNA序列。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张林		48	210	6.0	13.0
2	孔维信		15	42	4.0	5.0
3	丁露露		11	38	4.0	5.0
4	孙怀鑫		8	29	4.0	5.0
5	邓振兴	山东省医学科学院附属医院	1	0	0.0	0.0