鱼腥藻PCC7120染色体基因对asr0757/alr0758的表达优化及其鉴定

• 作者: 吴汇兰 陈思礼 陈洁
• 来源期刊: 华中师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 鱼腥藻PCC7120 asr0757/alr0758 表达 优化 鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 263-268
• 页数: 6页
• 分类号: Q812
• 字数: 4214字
• 语种: 中文

摘要

NCBI预测鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asr0757/alr0758可能构成一个毒素-抗毒素系统.为研究其是否属于毒素-抗毒素系统家族,分别构建这两个基因的表达载体.用1.0 mMIPTG诱导重组菌表达,优化表达条件,并对表达出的蛋白进行纯化与western blot检测.SDS-PAGE结果显示:asr0757与alr0758在37℃下诱导6h后,均成功诱导表达出目的蛋白asr0757(13.5 KD)和alr0758(17.9 KD).抗毒素表达量较好,毒素alr0758表达量较少.通过设置诱导时间梯度和IPTG浓度梯度优化毒素基因表达条件,优化结果显示:毒素基因alr0758在28℃,IPTG浓度为0.4 mM,诱导10 h时有最大表达量.蛋白纯化与western blot结果证实诱导表达的蛋白为目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈思礼	中南民族大学生命科学学院	47	170	7.0	11.0
2	陈洁	中南民族大学生命科学学院	4	5	2.0	2.0
3	吴汇兰	中南民族大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0