鱼腥藻铁吸收调节蛋白基因(alr0957)的克隆和表达

• 作者: 刘欣 尤隽丹 梅菊 陈思礼
• 来源期刊: 华中师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 鱼腥藻 PCC 7120 铁吸收调节蛋白(Fur) 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 页码范围: 332-334
• 分类号: Q812
• 字数: 2199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1190.2012.03.018

摘要

依据CyanoBase提供的鱼腥藻PCC7120 furC基因(alr0957)的序列信息设计了一对特异性引物,用Touch-down PCR的方法从基因组DNA中扩增得到大小约450 bp的目的片段.通过TA克隆的方法将该片段连接到pMD18-T载体上筛选出重组质粒pMD18-T-fur.然后进行双酶切,纯化furC基因,再连接到原核表达载体pET-28a(+)上,转化表达菌株BL21 (DE3).经PCR、双酶切和测序鉴定,对阳性菌株进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测重组蛋白.结果表明:在25℃条件下经1 mmol/L IPTG诱导20 h,融合蛋白筱成功表达,其分子量约为19 000,为进一步纯化蛋白和对基因的调控功能方面研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈思礼	中南民族大学生命科学学院	47	170	7.0	11.0
2	梅菊	中南民族大学生命科学学院	3	10	2.0	3.0
3	刘欣	中南民族大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0
4	尤隽丹	中南民族大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0