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转染siat7e基因的MDCK细胞悬浮性状分析与质控
转染siat7e基因的MDCK细胞悬浮性状分析与质控
作者:
刘晓凡
刘鹏
李薇
王革
马超
魏然
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
MDCK-siat7e细胞
悬浮
siat7e基因
摘要:
目的 分析转染siat7e基因的MDCK细胞(MDCK-siat7e)的悬浮特性,并建立相关质控方法.方法 将MDCK-siat7e细胞接种无血清培养基BD001,37 ℃,130 r/min振摇培养11d,显微镜观察不同培养时间细胞形态,并检测细胞生长浓度、活力及代谢状况.提取MDCK-siat7e细胞的mRNA,采用RT-PCR法扩增siat7e基因片段并测序.通过Real time PCR法检测不同代次(原代、10、20、30代)MDCK-siat7e细胞siat7e基因的表达量.结果 MDCK-siat7e细胞在无血清培养基中呈悬浮生长状态,细胞接种培养初期生长较慢,但活力较好;然后细胞生长经停滞期进入生长期,细胞生长加快且活力大于98%,细胞浓度达峰点后生长进入平台期;培养后期细胞浓度降低且活力下降.原代与传代细胞siat7e基因序列测定结果与GenBank公布的ST6GalNacV序列(AJ507292.1)一致.MDCK-siat7e细胞传至30代,仍可表达siat7e,表明外源siat7e基因整合入MDCK细胞基因组中,并随MDCK细胞传代持续地转录和表达.结论 本实验对siat7e基因的定性及表达量的分析可用于MDCK-siat7e细胞悬浮性的检测,为其作为疫苗用细胞基质的质量监控提供了依据.
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内容分析
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文献信息
篇名
转染siat7e基因的MDCK细胞悬浮性状分析与质控
来源期刊
中国生物制品学杂志
学科
生物学
关键词
MDCK-siat7e细胞
悬浮
siat7e基因
年,卷(期)
2016,(1)
所属期刊栏目
技术方法
研究方向
页码范围
75-78
页数
分类号
Q26
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
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姓名
单位
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被引次数
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魏然
28
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刘鹏
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刘晓凡
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李薇
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马超
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节点文献
MDCK-siat7e细胞
悬浮
siat7e基因
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物制品学杂志
主办单位:
中华预防医学会
长春生物制品研究所有限责任公司
出版周期:
月刊
ISSN:
1004-5503
CN:
22-1197/Q
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路3456号
邮发代号:
12-128
创刊时间:
1988
语种:
chi
出版文献量(篇)
5980
总下载数(次)
27
总被引数(次)
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