迟缓爱德华氏菌ETA1-L-GAPDH融合蛋白在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张泽峰 王春梅 王晶晶 王智
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 迟缓爱德华氏菌 融合蛋白 鱼用疫苗 gapdh etal 外膜蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 112-115
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文

摘要

迟缓爱德华氏菌是水产养殖中危害性极大的一种致病菌,该菌的两种外膜蛋白GAPDH和ETA1被证明可以独立产生免疫原性,具有开发成疫苗的潜力.文章将这两个蛋白融合表达以期增强疫苗的保护作用.采用PCR方法扩增出融合有gapdh基因和eta1基因的融合基因 rh,将该目的基因与表达载体pET-30a(+)连接,转入大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中表达融合蛋白,采用SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,并用镍柱和葡聚糖凝胶Sephadex G-100对融合蛋白进行了纯化,最后通过Western-blot对纯化的融合蛋白进行了验证.结果表明融合蛋白主要以包涵体形式表达,在破碎后的菌体沉淀中该蛋白含量高达73.6％,经过纯化后的融合蛋白纯度高达90％,并通过Western-blot得到了验证.上述结果表明表达载体构建成功,目的蛋白在大肠杆菌中大量表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春梅		58	259	10.0	13.0
2	张泽峰		4	4	1.0	2.0
3	王智		4	3	1.0	1.0
4	王晶晶		4	6	2.0	2.0