粘红酵母ATP-柠檬酸裂解酶提取方法研究

• 作者: 刘宏娟 张建安 林樟楠 王智琴
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 粘红酵母 粗酶提取 ATP-柠檬酸裂解酶 比活力
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 103-108
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.97
• 字数: 4489字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2016.01.017

摘要

为建立一种高效的粘红酵母ATP-柠檬酸裂解酶粗酶提取方法,对比了酶法、研磨法、超声波法和玻璃珠法对粘红酵母胞内粗酶提取的影响,通过可溶性蛋白浓度分析和ATP-柠檬酸裂解酶活性测定,对粗酶提取方法进行评价,并在此基础上从震荡时间和珠体装量方面对玻璃珠法粘红酵母ATP-柠檬酸裂解酶提取工艺进行了优化.可溶性蛋白浓度分析和ATP-柠檬酸裂解酶活性测定结果表明:玻璃珠法提取粗酶优于其他3种方法.对玻璃珠法进行进一步优化,得到的最优化的提取条件为细胞干重与珠体重量之比为1∶1,冰浴震荡时间为20min,在此条件下,ATP-柠檬酸裂解酶比活可达到0.98U· mg-1,分别是酶法、研磨法、超声波法测得酶活性的1.9,2.2,2.1倍,可溶性蛋白浓度为6.5mg· mL-1,分别是酶法、研磨法、超声波法测得酶活性的1.4,4.1,3.3倍.经过优化的玻璃珠法提取粘红酵母胞内粗酶液操作简便,且能够保持较高的ATP-柠檬酸裂解酶活性,是较理想的粘红酵母粗酶提取方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宏娟	清华大学核能与新能源技术研究院	29	462	13.0	21.0
2	张建安	清华大学核能与新能源技术研究院	57	867	16.0	27.0
3	林樟楠	清华大学核能与新能源技术研究院	3	0	0.0	0.0
5	王智琴	沈阳农业大学畜牧兽医学院	7	15	3.0	3.0