人类精子VDAC2基因启动子在小鼠GC-2spd细胞的克隆和报告基因载体构建

• 作者: 刘边疆 华艺博 奚伟 张建中 徐爱明 柳长坤 王海南 赵凯 陈伟
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: VDAC2基因 双荧光素酶报告系统 启动区(遗传学) 精子
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: R321.1
• 字数: 3320字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2016.03.002

摘要

目的 线粒体电压依赖性阴离子通道蛋白2 (Voltage-dependent anion channel 2,VDAC2)是VDAC重要的家族成员,参与机体众多的生理活动和病理疾病的发生发展.本次研究目的 主要是确定和验证人VDA C2基因启动子的活性,为进一步探究它的调控机制奠定基础.方法 通过从正常人射出的精子中提取基因组DNA.利用软件预测启动子区,我们针对性设计三对引物并正确的扩增出来.将验证正确的启动子序列结合到质粒PDSpsiCHECK-2中,转染到小鼠GC-2细胞中去.转染48h后,通过双荧光素酶报告基因系统检测预测片段的启动子活性.结果 VADC2基因上游-2000～+1000bp具有相对较高的活性.结论 这是首次对人类精子中VDA C2基因启动子的确定和活性验证,为后续研究VDAC2基因在精子的发生发展以及弱精子症方面提供新的研究思路.