人IGF1R启动子克隆及荧光素酶报告基因载体构建

• 作者: 吴章颖 李莎 汪雯雯 王世宣 阿比丹·吐尔汗江
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: IGF1R 启动子 荧光素酶报告基因 载体构建
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2801字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2014.01.004

摘要

目的 克隆人IGF1R基因启动子序列,构建IGF1R基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 运用PCR方法从HeLa细胞基因组DNA中获得目的 基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建IGF1R基因启动子报告基因载体;将重组质粒转染至HeLa细胞48 h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性.结果 PCR扩增出800 bp左右IGF1R基因启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HeLa细胞后经双荧光素酶报告基因检测确定重组体有启动子活性.结论 成功构建了IGF1R启动子报告基因载体,在细胞系中进行初步的活性分析得知所克隆的IGF1R基因调控序列内包含启动子活性区域.