抑癌基因BRCA1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性测定

• 作者: 樊飞跃 王大鹏 詹启敏 贾立立
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: BRCA1 启动子 荧光素酶 报告基因
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 465-468
• 分类号: Q78
• 字数: 2685字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人BRCA1基因的启动子,构建荧光素酶报告基因载体,并在细胞内检其活性,为其后续基因凋控研究提供依据.方法:采用PCR技术,从人正常宫颈组织细胞中扩增出BRCA1启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,测序所扩增的DNA序列,将其转染入HCT 116细胞中并检测其活性.结果:酶切及基因测序方法证实所构建质粒含有pGL3-basic全序列及BRCA1启动子上游调控序列,扩增的BRCA1启动子序列正确;双报告基因实验检测荧光素酶活力表明,p53缺失的HCT116细胞中BRCA1启动子明显增加(P<0.05),构建的报告基因具有启动子活性.结论:克隆BRCA1启动子及成功构建人BRCA1启动子报告基因,可实现快速、经济和准确地克隆已知基因启动子分子和构建启动子载体的目的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊飞跃	北京协和医学院放射医学研究所生物学研究室	9	22	3.0	4.0
2	贾立立	北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室	2	5	2.0	2.0
6	王大鹏	北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
10	詹启敏	北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室	2	2	1.0	1.0