B7-H1启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性检测

• 作者: 吴玉章 吴胜昔 朱广倍 费蕾 陈永文
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: B7-H1 启动子 双荧光素酶报告基因检测 活性测定
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 955-960
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 3021字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体,转染肝癌HepG2细胞进行活性检测.方法 PCR扩增B7-H1启动子上游区域基因片段,并插入到含有荧光素酶报告基因的载体PGL3-Basic中构建重组子,经双酶切和测序鉴定后,将重组子转染HepG2细胞,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶表达活性.结果 成功地构建了6种不同长度的PGL3-B7-H1-Luc荧光素酶表达质粒,分别命名为P88、P175、P203、P398、P723和P960.瞬时转染HepG2后经报告基因检测,P175、P203、P398、P723和P960所含5段启动子均具有转录活性,IFN-y作用后启动子活性明显增强,而P88转染组IFN-y作用后,荧光素酶活性无显著变化.结论 成功构建了B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴玉章	第三军医大学基础部免疫学教研室	325	1583	17.0	22.0
2	吴胜昔	重庆理工大学药学与生物工程学院	22	38	3.0	4.0
3	费蕾	第三军医大学基础部免疫学教研室	13	101	6.0	10.0
4	陈永文	第三军医大学基础部免疫学教研室	20	92	6.0	9.0
5	朱广倍	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	6	2.0	2.0