Snail启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其应用

• 作者: 张坤水 张秋桂 李玲玲 杜军 江冠民 谢婉莹
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 上皮细胞间质变 Snail 肿瘤转移 启动子
• 年，卷（期）: 2013,（31）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-17
• 页数: 6页
• 分类号: R73-3
• 字数: 4393字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建Snail启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic-Snail-luc并对其进行生物活性的鉴定及其初步的应用研究.方法 通过PCR技术从人血液基因组中钓出我们需要的具有启动子活性的Snail片段,双酶切后与双酶切的pGL3-Basic空载体连接成重组体pGL3-Basic-Snai1-luc,通过转化扩增,筛选出阳性克隆,并通过酶切,测序及生物学活性检测鉴定构建好的荧光素酶报告基因载体.结果 成功地构建了pGL3-Basic-Snai1-luc荧光素酶报告基因载体,并在CNE2细胞内鉴定了其在TGF-β1的诱导下,能启动荧光素酶的表达.此外,笔者通过Western blotting检测表明TGF-β1能显著性的诱导Snail蛋白的表达,充分证明了我们构建的pGL3-Basic-Snail-luc是具有生物学功能的.结论 具有生物活性的pGL3-Basic-Snai1-luc的构建成功为研究Snai1在EMT过程中的调控机制研究和以snail为靶标的抗肿瘤药物快速高通量的筛选提供了非常重要的研究工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玲玲	中山大学附属第五医院中心实验室	18	164	6.0	12.0
2	杜军	中山大学药学院	61	250	7.0	12.0
3	张坤水	中山大学附属第二医院药剂科	26	97	6.0	8.0
4	谢婉莹	南华大学附属第一医院检验科	7	56	2.0	7.0
5	张秋桂	南华大学附属第一医院检验科	44	343	9.0	17.0
6	江冠民	南华大学附属第一医院检验科	4	29	2.0	4.0