Shewanella haliotis BP-1海藻酸裂解酶基因的克隆表达

• 作者: 卢明倩 廖威 李锋 温顺华 王巧贞 黄庶识 黄桂媛
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 海藻酸裂解酶 克隆表达 酶活性测定 Shewanella haliotis BP-1
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 228-233
• 页数: 6页
• 分类号: Q74
• 字数: 3939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13656/j.cnki.gxkx.20160713.003

摘要

【目的】了解海洋细菌Shewanella haliotis B P-1中海藻酸裂解酶降解海藻酸钠的生物活性。【方法】应用基因克隆和大肠杆菌异源表达技术,过量表达海藻酸裂解酶,将粗酶液通过 DEAE Sepharose FF柱分离纯化后检测其酶活性。【结果】从S.haliotis BP-1菌株的基因组DNA中克隆得到一个大小为2157 bp的海藻酸裂解酶基因Alg17S ,该基因编码的海藻酸裂解酶 Alg17S属于PL17家族的蛋白,大小为79726 Da,其中包括N端26个氨基酸的信号肽,与Saccharophagus degradans 2-40菌株产生的海藻酸裂解酶 Alg17C 具有高度同源性,相似性为52%。经纯化后获得的重组酶 Alg17S和△snAlg17S(N端不含26个氨基酸的信号肽)均具有降解海藻酸钠的活性,但△snAlg17S对海藻酸钠的催化活性比 Alg17S高,其酶比活力高达9635 U/mg。【结论】重组海藻酸裂解酶△snAlg17S兼具高表达水平及高酶活性,是进一步研究海藻酸盐糖化和生物燃料生产的潜在的优势酶。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖威		47	153	7.0	11.0
2	黄庶识	广西科学院生物物理实验室	84	750	13.0	23.0
3	卢明倩	广西科学院生物物理实验室	10	15	3.0	3.0
4	黄桂媛	广西科学院生物物理实验室	4	3	1.0	1.0
5	王巧贞	广西科学院生物物理实验室	6	6	2.0	2.0
6	温顺华		3	3	1.0	1.0