四膜虫金属硫蛋白MTT2在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 王伟 许静 郭荣
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 金属硫蛋白 原核表达 纯化 四膜虫
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 301-306
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2016.02.023

摘要

金属硫蛋白是一种在多种生物中存在的多功能蛋白,纤毛虫金属硫蛋白在结构和功能上具有物种特殊性.从四膜虫Tetrah ymenaelliotti中鉴定到一种新的金属硫蛋白基因Te-MTT2,该基因全长273bp,无内含子,编码90个氨基酸.为了分析Te-MTT2的功能,分别构建了重组质粒pGST-Te-MTT2和pSUMO-Te-MTT2并转化大肠杆菌BL21.0.05 mmol/L IPTG诱导大肠杆菌BL21/pGST-Te-MTT2和BL21/pSUMO-Te-MTT2表达融合蛋白GST-Te-MTT2和SUMO-Te-MTT2.GST-Te-MTT2的表达量占到总蛋白的16.7％,其中29.9％可溶;SUMO-Te-MTT2的表达量占到总蛋白的14.2％,其中76.2％可溶.SUMO-Te-MTT2经Ni柱亲和纯化获得电泳纯的蛋白.85℃,15 min温浴后,SUMO-Te-MTT2蛋白在10 mmol/L PBS溶液中稳定存在.结果表明SUMO表达系统提高了Te-MTT2的可溶性表达,Te-MTT2的表达纯化为进一步分析其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	78	319	11.0	15.0
2	许静	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	30	27	3.0	5.0
3	郭荣	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0