Noggin基因沉默表达载体的构建及效果评价

• 作者: 孙兆增 曾林 游颖 马雨楠
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Noggin基因 基因沉默 表达载体 Uncv无毛小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 37-42
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4612字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2016.01.007

摘要

目的 构建慢病毒介导的NogginRNAi干扰序列,并分析这些干扰序列对Noggin基因的沉默效果.方法 针对目的基因Noggin的mRNA设计四条干扰序列,并将这些序列连接到Lenti-KD慢病毒载体,将重组质粒瞬时转染HEK-293T包装细胞,获得重组慢病毒.将重组病毒感染MC3T3-EI细胞,利用puromycin进行筛选,获得稳定表达细胞系.通过实时荧光定量PCR和Western blot技术分析不同干扰序列的干扰效果.结果 实时荧光定量PCR结果显示,四种干扰序列对Noggin基因的表达都有一定的沉默效果,但只有shNoggin-1(P＜0.01)对其表达影响显著.Western blot结果显示,四种干扰序列中只有shNoggin-1 (P ＜0.01)对Noggin的表达蛋白具有显著的降低作用.结论 获得了一种Noggin基因的干扰序列,该序列能够干扰Noggin基因mRNA的稳定性,从而影响蛋白的表达.该干扰序列可以用于部分敲除Noggin基因,从而用于研究Noggin基因的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾林	军事医学科学院实验动物中心	57	237	9.0	10.0
2	孙兆增	军事医学科学院实验动物中心	27	83	6.0	8.0
3	游颖	军事医学科学院实验动物中心	5	12	1.0	3.0
4	马雨楠	军事医学科学院实验动物中心	7	14	2.0	3.0