猪硒蛋白P基因克隆、鉴定及组织mRNA相对表达量分析

• 作者: 何爱华 刘光芒 周继昌 汤加勇 蔡景义 贾刚 赵华 陈小玲
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 Sepp1 克隆 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 858-863
• 页数: 6页
• 分类号: S828
• 字数: 4303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2016.03.027

摘要

本试验旨在克隆、鉴定猪硒蛋白P基因（ Sepp1），并探明其在猪不同组织中的mRNA相对表达量，为以猪为模型研究硒蛋白P（ SelP）的功能奠定基础。根据表达序列标签（ EST）序列设计引物，利用cDNA末端快速克隆（3′-RACE ）技术从猪肝脏总RNA中扩增出含开放阅读框（ ORF）至polyA片段，然后与EST序列进行拼接；采用荧光定量PCR技术考察Sepp1在猪9个组织中的mRNA相对表达量。结果显示：1）扩增出共1707 bp的片段，测序后与EST拼接获得了2109 bp的猪Sepp1序列，并提交至NCBI GenBank数据库，序列号为EF113596．2；该基因1170 bp的ORF编码区和对应的氨基酸残基与人相应序列分别有83．72％和75．64％序列同源性，其编码390个氨基酸，含有14个硒代半胱氨酸（ Sec）残基，分别位于第59、267、286、309、311、327、339、352、354、361、376、378、385和387位。2） Sepp1 mRNA在猪组织中广泛分布，在肝脏中具有最高分布，依次为甲状腺＞肾脏＞睾丸＞下丘脑＞脾脏＞垂体＞心脏＞肌肉。本试验成功克隆、鉴定了猪Sepp1，检测了其在猪不同组织中表达分布情况，为其进一步以猪为模型探讨其功能奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾刚	四川农业大学动物营养研究所	74	600	12.0	20.0
2	赵华	四川农业大学动物营养研究所	32	190	8.0	13.0
3	陈小玲	四川农业大学动物营养研究所	36	171	7.0	12.0
4	汤加勇	四川农业大学动物营养研究所	14	86	5.0	9.0
5	周继昌	深圳市慢性病防治中心分子生物学实验室	33	111	5.0	9.0
6	刘光芒	四川农业大学动物营养研究所	26	127	6.0	10.0
7	何爱华	四川农业大学动物营养研究所	3	1	1.0	1.0
8	蔡景义	四川农业大学动物营养研究所	35	226	9.0	13.0