体外模拟淡水鱼小清蛋白对胃肠消化的影响

• 作者: 关荣发 刘明启 梁提松 肖朝耿 陶淼
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 淡水鱼 小清蛋白 纯化 过敏原 鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1908-1914
• 分类号: S565.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.12.013

摘要

大多数食物过敏原的理化性质决定了蛋白质在消化道中的稳定性.模拟胃液(simulated gastric fluid,SGF)的稳定性是评估食物过敏的一个重要参数.为了解一种主要的鱼类过敏原小清蛋白(parvalbumin,PV)与来自鲤鱼(Cyprinus carpio)和鲢鱼(Hypophthalmichthys molhrix)肌肉中的非致敏性蛋白在SGF和模拟肠液(simulated intestinal fluid,SIF)中的稳定性差异,本研究采用3种蛋白水解酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶和来自猪的胰凝乳蛋白酶)来模拟人(Homo sapiens)体肠道的消化蛋白酶;结合两次三氯乙酸沉淀法和凝胶过滤层析法纯化PV,通过Tricine-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,Tricine-SDS-PAGE)和Western blot对3种蛋白在模拟肠胃液中的稳定性进行了评估.结果显示,鲤鱼和鲢鱼的PV都获得了分子量约10kD的蛋白,同时在SGF中鲤鱼和鲢鱼的纯化PV也获得了相同的分子量蛋白.胃蛋白酶使原先的PV带几乎在60 min内完全降解,并观察到一些稳定的肽片段,而胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶在240 min后都无法有效降解PV.在SGF中的非致敏性鱼浆蛋白在很短的时间内迅速降解,而PV的消化时间延长.Western blot分析表明,抗鲢鱼PV多克隆抗体可以特异性地检测到PV及其降解产物.PV比非致敏性蛋白更能抵抗蛋白酶消化,相比胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶,胃蛋白酶处理能更有效地减少超敏反应.研究结果为未来低致敏性鱼产品的开发提供了理论参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘明启	中国计量大学浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	37	115	6.0	9.0
2	关荣发	中国计量大学浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	43	225	9.0	12.0
3	肖朝耿	浙江省农业科学院食品科学研究所	39	172	8.0	10.0
4	陶淼	中国计量大学浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	梁提松	中国计量大学浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	1	0	0.0	0.0