坏死性凋亡与活性氧的相互作用介导高糖引起的H9c2心肌细胞损伤

• 作者: 何洁仪 余盛龙 宋明才 廖新学 张稳柱 梁伟杰 郑东诞 陈君 陈景福
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 坏死性凋亡 活性氧 高血糖 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 781-787
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨坏死性凋亡(Nec)与活性氧(ROS)之间的相互作用能否介导高糖引起的H9c2心肌细胞损伤.方法 应用蛋白质免疫印迹试验(Western blot)检测心肌细胞RIP3蛋白的表达水平;细胞计数盒测定心肌细胞存活率;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜摄片测定线粒体膜电位(MMP);2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色荧光显微镜摄片检测心肌细胞内ROS水平;Hoechst 33258核染色荧光显微镜摄片测定凋亡细胞的数量.结果 应用高糖(HG,35 mmol/L葡萄糖)分别处理H9c2细胞0～24h,其中3、6、9、12和24h均能明显地上调RIP3蛋白的表达水平,24h时RIP3蛋白表达上调最为明显.应用100 μmol/L Nec的特异性阻断剂necrostatin-1 (Nee-1)共处理心肌细胞可对抗高糖引起的RIP3蛋白表达的上调作用.此外,100 μmol/L Nec-1能显著地抑制高糖引起的细胞毒性、线粒体损伤及氧化应激,使细胞存活率升高,MMP丢失及ROS生成减少.1 000 μmol/LROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)预处理心肌细胞60 min,可明显地抑制高糖对心肌细胞RIP3蛋白表达的上调作用;此外,高糖诱导的细胞凋亡和细胞毒性作用,经NAC预处理后均能得到显著的抑制.结论 Nec与ROS之间的相互作用介导高糖对心肌细胞的损伤.