硫化氢通过抑制坏死性凋亡对抗高糖引起的H9 c2心肌细胞损伤

• 作者: 何洁仪 余盛龙 宋明才 廖新学 张稳柱 梁伟杰 郑东诞 陈君 陈景福
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 坏死性凋亡 硫化氢 高糖 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 385-391
• 页数: 7页
• 分类号: R363.2
• 字数: 5024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2016.03.001

摘要

目的：探讨硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）能否通过调控坏死性凋亡（necroptosis）对抗高糖（HG）引起的H9c2心肌细胞损伤。方法：应用Western blot 法检测心肌细胞内能反映坏死性凋亡的RIP3蛋白和cleaved caspase-3蛋白的水平；细胞计数盒测定心肌细胞存活率；双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧簇（ reactive oxygen species ，ROS）水平；罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位（ mitochondrial membrane potential ，MMP）；Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞的数量。结果：应用HG （35 mmol／L葡萄糖）处理H9c2心肌细胞3 h、6 h、9 h、12 h和24 h均能明显地上调RIP3蛋白的表达水平，其中24 h时RIP3蛋白水平增加最明显。400μmol／L硫氢化钠（ NaHS；为H2 S的供体）预处理或坏死性凋亡的特异性阻断剂necrostatin-1（ Nec-1；100μmol／L）共处理心肌细胞均能明显地抑制HG对RIP3蛋白表达的上调作用。此外， NaHS预处理或Nec-1共处理心肌细胞均显著地抑制HG引起的心肌细胞损伤，使细胞存活率升高，ROS生成及MMP丢失减少。另一方面，400μmol／L NaHS预处理心肌细胞能使凋亡细胞数量及cleaved caspase-3表达明显减少。结论：H2 S可通过抑制坏死性凋亡保护心肌细胞，对抗高糖引起的损伤。