红鳍东方鲀去乙酰化酶 SIRT3基因的克隆及原核表达

• 作者: 千智斌 姬明丽 张伟 张军华
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 红鳍东方鲀 去乙酰化酶 SIRT3 基因 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?水产
• 页码范围: 424-428
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S917
• 字数: 3443字
• 语种: 中文

摘要

从红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肝脏组织中提取总 RNA，通过 RT–PCR 扩增，获得 SIRT3基因的编码阅读框(ORF)，用原核表达载体 pET32a(+)构建 pET32a/SIRT3重组质粒，用异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)将重组质粒 pET32a/STRT3在大肠杆菌 Rosetta (DE3)进行诱导表达，并用镍柱纯化融合表达蛋白。结果显示，红鳍东方鲀 SIRT3基因(trSIRT3)ORF 区大小为1263 bp 大小，编码420个氨基酸。经 IPTG 诱导表达后，获得1个带组氨酸(His)标签的融合蛋白，目的蛋白主要存在于上清溶液中，为可溶性表达。用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化，获得了相对分子质量约66000的重组蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姬明丽	新乡医学院基础医学院	68	208	6.0	9.0
2	千智斌	新乡医学院基础医学院	59	186	6.0	9.0
3	张伟	新乡医学院基础医学院	19	18	2.0	3.0
4	张军华	新乡医学院基础医学院	2	1	1.0	1.0