利用CRISPR/Cas9技术制备Mindin基因敲除小鼠

• 作者: 纪慈数 贺颖 赵志刚
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9 基因敲除 Mindin
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 922-926
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 2820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6043/j.issn.0438-0479.201604028

摘要

针对Mindin基因编码序列设计3条单链向导 RNA(sgRNA),制备相应质粒,将表达 sgRNA和 Cas9蛋白的质粒共同电转入小鼠成纤维细胞 L929中,通过药物筛选获得细胞库.经单克隆测序检测细胞库中基因组的突变效率,选择效率最佳的 sgRNA.体外转录获取sgRNA和Cas9 mRNA,进行小鼠受精卵的显微注射后提取小鼠基因组DNA测序鉴定.产生的40只小鼠中17只发生不同程度的碱基插入或缺失,其中23号小鼠缺失10个碱基造成移码突变,Mindin 基因表达被破坏,成功构建出Mindin基因敲除小鼠,为深入研究Mindin基因的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	纪慈数	厦门大学实验动物中心	6	15	2.0	3.0
2	贺颖	厦门大学实验动物中心	5	5	2.0	2.0
3	赵志刚		1	1	1.0	1.0