利用CRISPR/Cas9建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株

• 作者: 吴贵 纪慈数 贺颖
• 来源期刊: 医学信息
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9 基因敲除 Mindin
• 年，卷（期）: 2016,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 82-83
• 页数: 2页
• 分类号: Q7
• 字数: 2251字
• 语种: 中文

摘要

目的利用CRISPR/Cas9技术建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株。方法针对Mindin基因编码序列设计三个向导RNA(sgRNA)，将表达sgRNA和Cas9蛋白的质粒共同电转进小鼠成纤维细胞L929中，加入药物筛选获得细胞库。测序检测细胞库基因组的突变效率，并从高突变细胞库中挑取单克隆进一步培养与鉴定。结果三个sgRNA都能介导CRSIPR/Cas9高效编辑Mindin基因靶位点，从中挑选得到Mindin基因缺失并可稳定遗传的L929细胞株。结论我们得到了一个稳定敲除Mindin基因的L929细胞株，为后续研究Mindin基因在肠癌发生与发展过程中的作用提供了必要的研究素材，为其动物模型的建立打下坚实的基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	纪慈数	厦门大学实验动物中心	6	15	2.0	3.0
2	吴贵		1	0	0.0	0.0
3	贺颖	厦门大学实验动物中心	5	5	2.0	2.0