杀粉蝶菌素A1生物合成基因簇中甲基转移酶PieB2的功能

• 作者: 刘倩 由德林 赵震宇
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 杀粉蝶菌素A1 甲基转移酶 基因敲除 生物合成
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1186-1193
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150479

摘要

[目的]研究杀粉蝶菌素A1产生菌中甲基转移酶基因pieB2的功能.[方法]利用接合转移和同源重组双交换的方法,构建pieB2基因缺失突变株,以及利用接合转移的方法,构建回补菌株.通过高保真PCR克隆pieB2基因到表达载体pET28a上,构建质粒pJTU5997,转化人大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pLysE中诱导表达.利用高效液相色谱检测PieB2的体外酶活.[结果]获得了pieB2基因缺失的双交换突变株.发酵结果显示,该突变株不再产生杀粉蝶菌素A1,而是积累了一种脱甲基产物.N-末端融合组氨酸标签的PieB2在大肠杆菌中获得可溶性表达,通过体外催化证明了PieB2甲基转移酶的功能.[结论]体内遗传实验和体外生化实验证明了PieB2作为甲基转移酶在杀粉蝶菌素A1合成中的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘倩	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	17	18	3.0	4.0
2	由德林	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	5	5	1.0	2.0
3	赵震宇	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	1	1	1.0	1.0