艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的表达及抗原性分析

• 作者: 冯晓燕 宋晓国 张贺秋 杨锡琴 王宏伟 王建霞 罗芸 金大智 黄忱
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 艰难梭菌 谷氨酸脱氢酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 710-712,732
• 页数: 4页
• 分类号: R373.25|Q786
• 字数: 2835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.09.004

摘要

目的：构建艰难梭菌（CD）谷氨酸脱氢酶（GDH）的原核表达载体，表达重组蛋白并鉴定其抗原活性。方法以 CD 的 ATCC43255菌株基因组 DNA 为模板，通过 PCR 法扩增 GDH 全长基因片段，构建原核表达载体并转化到大肠杆菌中，IPTG 诱导表达 GDH 蛋白，并用 Ni 柱进行纯化。利用 CD 抗原检测试剂盒对 GDH 抗原区段的抗原性进行鉴定。结果构建的原核表达载体 pET-28a／GDH 可在大肠杆菌中成功表达，获得的 GDH 抗原能与相应抗体产生特异性反应。结论原核表达的 CD 的 GDH 抗原具有很好的抗原活性，为进一步制备相应抗体并建立CD 的 GDH 抗原的免疫检测方法奠定了基础。