CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白的共定位研究

• 作者: 刘晓颖 印叶盛 李子剑 沙启飞 潘林鑫 王梦媛 耿慧武 范礼斌
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: CLIC1 质粒构建 免疫荧光 Western blot
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1722-1726
• 页数: 5页
• 分类号: Q28|R392.7
• 字数: 3309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.12.002

摘要

目的：构建胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)点突变体的真核表达质粒，进行CLIC1突变体的表达、定位及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白( Sedlin)的共定位研究，为进一步揭示其功能奠定基础。方法以CLIC1全长cDNA序列为模板，构建3个真核表达质粒即 pcDNA3．1-CLIC1(C24A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1(C59A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1( C24A-C59A)-FLAG；Western blot法检测CLIC1及其点突变体在 HEK 293T 细胞中的表达；免疫荧光技术了解CLIC1及其点突变体蛋白在COS7细胞中的定位及与Sedlin的共定位情况。结果成功构建了CLIC1点突变体的真核表达质粒；Western blot 结果显示3个点突变体蛋白在HEK293T细胞中均能表达，突变体的分子量低于野生型的；免疫荧光实验表明CLIC1蛋白在细胞质和细胞核都有表达，但主要在细胞核。 CLIC1点突变体蛋白定位在胞质中，细胞核中无分布，与 Sedlin 蛋白在胞质存在共定位。结论CLIC1的3种点突变体均能在哺乳动物细胞中有效表达；CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白均存在共定位，提示两种蛋白之间可能存在相互作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	耿慧武	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	17	37	3.0	5.0
2	刘晓颖	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	57	121	6.0	8.0
3	潘林鑫	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	19	40	3.0	5.0
4	沙启飞	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	1	1	1.0	1.0
5	王梦媛	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	2	2	1.0	1.0
6	印叶盛	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	1	1	1.0	1.0
7	李子剑	安徽医科大学生命科学学院生物教研室	1	1	1.0	1.0