RACK1及其缺失突变体与 CLIC1的共定位研究

• 作者: 刘晓颖 朱亮亮 王蓓华 范礼斌
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RACK1 质粒构建 转染 免疫荧光 Western blot
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1543-1546,1547
• 页数: 5页
• 分类号: R349.65|R349.83
• 字数: 3167字
• 语种: 中文

摘要

目的：运用分子克隆技术构建活化蛋白激酶 C 受体1（RACK1）突变体的真核表达质粒，进行 RACK1突变体的表达、定位及其与胞内氯离子通道蛋白1（CLIC1）蛋白的共定位研究，为其进一步的功能研究奠定基础。方法以RACK1全长 cDNA 序列为模板，构建真核表达质粒 pcD-NA3．1-RACK1-N （1-138）-FLAG、pcDNA3．1-RACK1-C （130-317）-FLAG；Western blot 法检测突变体在哺乳动物细胞中的表达；用免疫荧光技术了解突变体蛋白在哺乳动物细胞中的共定位情况。结果成功构建了 RACK1突变体的真核表达质粒；Western blot 法检测到蛋白主要在胞质中表达，核内有部分表达；免疫荧光实验表明，RACK1及突变体蛋白主要定位在胞质与核膜，细胞核中也有少量表达，与 CLIC1蛋白存在共定位。结论成功构建了 RACK1缺失突变体，并在真核细胞中成功表达；RACK1及突变体与 CLIC1蛋白在哺乳动物细胞中均存在不同程度的共定位，蛋白之间可能存在相互作用，为 RACK1蛋白的功能研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范礼斌	安徽医科大学生命科学学院生物学系	53	174	8.0	9.0
2	刘晓颖	安徽医科大学生命科学学院生物学系	57	121	6.0	8.0
3	朱亮亮	安徽医科大学生命科学学院生物学系	3	1	1.0	1.0
4	王蓓华	安徽医科大学生命科学学院生物学系	3	3	1.0	1.0