氯离子通道蛋白1的缺失突变体CLIC1(△49-51)与Sedlin蛋白相互作用的研究

• 作者: 刘晓颖 朱亮亮 洪翠丽 潘林鑫 耿慧武 金振辉
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: CLIC1缺失突变体 免疫荧光 免疫共沉淀 GST pulldown
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1690-1695
• 页数: 6页
• 分类号: Q28|R392.7
• 字数: 4936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.11.008

摘要

目的 探究胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)的缺失突变体CLIC1(△49-51)在哺乳动物细胞中的表达、定位改变,及与Sedlin蛋白在体内、体外相互作用的影响.方法 构建CLIC1的缺失突变体的真核表达质粒pcDNA3.1-CLIC1(△49-51)-FLAG;免疫荧光观察CLIC1(△49-51)与Sedlin在COS7细胞中的共定位;在HEK 293T细胞中进行免疫共沉淀和GST pulldown实验,研究CLIC1(△49-51)与Sedlin的相互作用.结果 CLIC1(△49-51)在COS7细胞中主要定位于细胞质,小部分定位于细胞核.相对于野生型CLIC1的细胞核定位,缺失突变体的细胞内定位发生明显改变并且与Sedlin蛋白没有共定位.Western blot结果显示CLIC1(△49-51)能在HEK 293T细胞中有效表达;免疫共沉淀实验结果表明其与Sedlin在体内没有相互作用;GST pulldown结果表明其与Sedlin在体外没有相互作用.结论 CLIC1蛋白的第49～51位氨基酸序列KRR对CLIC1蛋白在细胞内的正确定位发挥重要作用;其缺失突变后影响了CLIC1在细胞内的定位、表达及CLIC1与Sedlin的相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	耿慧武	安徽医科大学生命科学学院生物学系	17	37	3.0	5.0
2	刘晓颖	安徽医科大学生命科学学院生物学系	57	121	6.0	8.0
3	潘林鑫	安徽医科大学生命科学学院生物学系	19	40	3.0	5.0
4	朱亮亮	安徽医科大学生命科学学院生物学系	3	1	1.0	1.0
5	洪翠丽	安徽医科大学生命科学学院生物学系	1	0	0.0	0.0
6	金振辉	安徽医科大学生命科学学院生物学系	1	0	0.0	0.0