PchsA驱动的烟草orf25基因表达载体构建及遗传转化

• 作者: 刘齐元 吴凌敏 周玮 王建革 聂亚平 谢丽娟 钟思荣 陶瑶 饶文平
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 烟草 orf25基因 表达载体构建 遗传转化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1506-1514
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2016.08.1506

摘要

为研究orf25基因的功能及其与烟草雄性不育性的相关性,通过PCR方法从质粒pUC57-PchsA中扩增了花特异性启动子PchsA,并以其取代植物表达载体pBI121中的组成型启动子CaMV35S,然后将orf25基因插入到PchsA启动子下游,构建由PchsA启动子驱动的oef25基因表达载体,测序结果显示植物表达载体pBI121-PchsA-orf25构建成功.将该表达载体导入根癌农杆菌LBA4404中,采用根癌农杆菌介导法遗传转化雄性不育烟草MS革新3号,共获得76株转基因烟草植株,经PCR鉴定,转基因阳性植株为18株,转化率为23.7％.研究结果证明目的基因orf25已整合到烟草基因组中,为进一步探究该基因的功能及其与烟草雄性不育性的关系奠定了基础.