没食子酸脱羧酶的分离与纯化

• 作者: 李文君 王成章
• 来源期刊: 天然产物研究与开发
• 学科: 生物学
• 关键词: 没食子酸脱羧酶 微生物降解 焦性没食子酸 结构表征
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 开发研究
• 页码范围: 1109-1115,1059
• 页数: 8页
• 分类号: Q814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16333/j.1001-6880.2016.7.021

摘要

本实验研究了没食子酸脱羧酶(Gallic acid decarboxylase,GAD)的提取、分离、分析及结构表征.建立了考马斯亮蓝法(Y=4.8748X-0.0255,R2=0.9922)和双缩脲法(Y=0.2476X+ 0.0003,R2=0.9993)测定GAD蛋白含量的线性方程.对GAD粗酶液,先采用pH为6,60％/70％的(NH4)2SO4盐沉淀32 h;然后,利用35 kD透析膜处理料液12 ～16 h;再将透析液经二乙氨基乙基(Diethyl Aminoethanol,DEAE)纤维素树脂,在pH为6.5时饱和吸附量可达2.838 mg/g,采用0.4 mol/L NaCl溶液进行洗脱的洗脱液经过G-100葡聚糖凝胶纯化.采用SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳分离得到蛋白样品条带,MALDI-TOF-MS进行结构表征,得到的蛋白分子质量45.62kD,等电点5.19,与已知蛋白质gi/334732950匹配度为53,说明两者具有相似性,但匹配到的序列组仅占蛋白全序列的3％,初步推测GAD可能是一种新的酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王成章		73	687	15.0	22.0
2	李文君		8	23	3.0	4.0