增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒疫苗的制备、纯化及活性研究

• 作者: 张惠中 李岩 杨铭 王希 王琳 董轲
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Trop2 CD40L 病毒样颗粒疫苗
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,9
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.16717-414.2016.04.001

摘要

目的 获得嵌合免疫增强佐剂CD40配体(CD40L)的Trop2-CD40L病毒样颗粒(VLPs)疫苗,为后续探究VLPs在肿瘤治疗中的免疫原性及免疫保护作用奠定基础.方法 通过重叠延伸PCR方法扩增以Trop2为靶点、嵌合免疫佐剂CD40L的Trop2-CD40L融合基因,构建杆状病毒表达载体pFastbaTM/Trop2-CD40L,并转化大肠埃希菌E.coli DH10bac,提取杆粒并经PCR鉴定成功命名为Trop2-CD40L Bacmid,后者转染Tn5昆虫细胞获得重组病毒Trop2-CD40L rBV,与Gag rBV共感染昆虫细胞制备重组病毒样颗粒,透析浓缩后蔗糖密度梯度离心纯化,Western Blot鉴定VLPs目的蛋白表达、电镜观察所制备VLPs形态,Cytokine ELISA方法检测Trop2-CD40L VLPs体外生物学活性.结果 成功扩增了Trop2-CD40L融合基因,通过杆状病毒表达系统、借助SIV Gag衣壳蛋白装配特点成功制备了增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒,与Trop2 VLPs比较具有更好的生物学活性,差异具有统计学意义(t=7.266,,P＜0.05).结论 制备出具有一定生物学活性的增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒,证实了CD40L作为免疫佐剂使用有免疫增强效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董轲	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	33	93	5.0	8.0
2	张惠中	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	196	724	13.0	17.0
3	王琳	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	77	375	12.0	16.0
4	王希	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	14	28	2.0	5.0
5	李岩	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	57	218	7.0	11.0
6	杨铭	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	7	34	2.0	5.0