检测支原体属特异性的5种PCR方法的评估和应用

• 作者: 刘永生 梁荣 王展慧 王绍伟 秦明明 赵天荣 赵萍 郝华芳 陈胜利
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: PCR 支原体属 筛选 常规诊断
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: S831.5
• 字数: 3461字
• 语种: 中文

摘要

为了筛选一种可靠的PCR方法作为实验室日常快速检测支原体的手段,利用实验室保存的17种55株支原体和13种16株细菌,对5种已发表的支原体属特异性PCR方法进行了评估和筛选.结果显示,方法4(使用引物对RNA5和MGSO扩增1 021 bp的16S rRNA基因片段)具有良好的特异性,能够完全区分支原体与非支原体细菌,以牛支原体为扩增对象,最低能够检出10 pg牛支原体基因组DNA以及浓度为100 ccu/mL的牛支原体培养物.利用该PCR方法和支原体分离方法检测人工感染牛支原体样品和临床采集样品73份,二者符合率为93.15％.结果表明方法4可作为实验室支原体常规快速检测方法.