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摘要:
目的:重组表达结核分枝杆菌融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3,分析其诊断结核病的价值。方法:重组 PCR扩增 TB10.4-Hsp16.3融合基因,克隆至 pMD18-T 载体,测序鉴定后,亚克隆至原核表达载体 pET28a(+),PCR 和双酶切鉴定阳性重组子,将重组 DNA 转化 E.coli BL21,筛选阳性菌株,经 IPTG 诱导表达融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3,超声裂解菌体,对包涵体进行变性溶解和复性,金属螯合层析纯化,Western blot 分析其免疫学活性,ELISA 评价其诊断结核病的价值。结果:成功获得约750bp 的融合基因 TB10.4-Hsp16.3,构建了融合蛋白的重组表达质粒 pET-TB10.4-Hsp16.3,表达、纯化获得分子量约29kDa 的融合蛋白,能被结核病患者血清特异识别;其 ELISA 诊断结核病的灵敏度为89.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为89.1%,诊断效率达90.0%。结论:成功表达可用于结核病诊断的结核分枝杆菌融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3。
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文献信息
篇名 结核分枝杆菌重组融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3诊断结核病
来源期刊 湖南师范大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 结核分枝杆菌 TB10.4-Hsp16.3 表达 结核病
年,卷(期) 2016,(2) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 12-15
页数 4页 分类号 R52
字数 3078字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 袁仕善 湖南师范大学医学院 51 171 7.0 10.0
2 谭云洪 28 114 6.0 9.0
3 任琪琪 湖南师范大学医学院 5 6 2.0 2.0
4 郭婧玮 2 3 1.0 1.0
5 蒋华科 湖南师范大学医学院 3 5 2.0 2.0
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节点文献
结核分枝杆菌
TB10.4-Hsp16.3
表达
结核病
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
湖南师范大学学报(医学版)
双月刊
1673-016X
43-1449/R
大16开
湖南省长沙市岳麓区咸嘉湖,《湖南师范大学学报(医学版)》编辑部
2004
chi
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