质粒短发夹RNA对小鼠肾内髓集合管细胞Klotho基因的影响

• 作者: 汪汉 蔡盈盈 邓珏琳
• 来源期刊: 华西医学
• 关键词: Klotho 衰老 质粒短发夹RNA 肾脏
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1205-1208
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-0179.201600329

摘要

目的 筛选质粒,研究质粒短发夹RNA (shRNA)对小鼠肾内髓集合管细胞(IMCD3) Klotho基因的抑制作用.方法 针对Klotho基因的3个位点设计并合成3对Klotho-shRNA序列(shRNA转染1、2、3组),构建其表达质粒pRNAU6-Klotho,并设置阴性序列(阴性对照组)及正常IMCD3细胞(未处理组)为对照,以Lipofactine2000转染至IMCD3细胞,24 h后采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测IMCD3细胞Klotho基因mRNA及蛋白表达水平.结果 转染后,RT-PCR显示shRNA转染2组IMCD3细胞KlothomRNA水平与未处理组和阴性对照组相比较,均存在统计学意义(P＜0.01);蛋白质印迹法结果显示与未处理组、阴性对照组、shRNA转染1组及shRNA转染3组相比,shRNA转染2组IMCD3细胞的Klotho蛋白水平差异均有统计学意义(P＜0.001).结论 质粒shRNA能高效抑制小鼠肾脏IMCD3细胞Klotho的表达,提示其在肾脏病研究中可有一定的作用,并为下一步研究筛选出一条合适的干扰序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓珏琳		38	159	7.0	10.0
2	蔡盈盈	成都医学院第一附属医院	6	9	1.0	3.0
3	汪汉		30	90	6.0	8.0