利用CRISPR系统介导人类mir-505基因位点的编辑

• 作者: 周宇荀 常雪莹 李凯 王斯佳 肖君华 邓倩云
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR系统 Mir-505 SgRNA T7E1 assay 剪切效率
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 257-260,224
• 分类号: Q291|R-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.02.014

摘要

目的:通过针对人源mir-505基因,设计不同sgRNA,从而利用CRIPSR系统对mir-505基因位点进行编辑,并探讨CRISPR系统对靶点的剪切效率的影响因素.方法:针对人源mir-505基因设计两条具有不同GC％的sgRNA,随后分别将其构建入41824-sgRNA表达载体和42230-Cas9蛋白/sgRNA共表达载体,并将表达载体利用脂质体转染法转染入人类细胞,通过T7E1assay检测不同CRISPR系统对靶点剪切效率的影响.结果:对靶点的剪切与Cas9蛋白和sgRNA的剂量成正比;当sgRNA与Cas9蛋白共传递时,也能够明显提高靶点的剪切效率;而较低的sgRNA的GC％会降低其对靶点的剪切效率.结论:本研究利用CRISPR系统靶向人源细胞的mir-505基因,使得mir-505基因发生突变.CRISPR系统对靶点的剪切效率和sgRNA和Cas9蛋白的剂量、sgRNA是否和Cas9蛋白共传递以及sgRNA的GC％有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖君华	东华大学生物科学与技术研究所	58	137	7.0	9.0
2	李凯	东华大学生物科学与技术研究所	58	122	6.0	9.0
3	周宇荀	东华大学生物科学与技术研究所	53	102	6.0	9.0
4	邓倩云	东华大学生物科学与技术研究所	4	0	0.0	0.0
5	常雪莹	东华大学生物科学与技术研究所	4	0	0.0	0.0
6	王斯佳	东华大学生物科学与技术研究所	3	1	1.0	1.0