ASK1巯基亚硝基化对其活性的影响

• 作者: 厉书林 高芳
• 来源期刊: 齐齐哈尔医学院学报
• 关键词: ASK1 NO 巯基亚硝基化 活化
• 年，卷（期）: 2016,（29）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3617-3620
• 页数: 4页
• 字数: 4019字
• 语种: 中文

摘要

目的：在HEK293细胞中研究ASK1巯基亚硝基化对其活性的影响。方法获得ASK1真核表达载体及其869位半胱氨酸突变体，利用脂质体2000高效转染至HEK293细胞。转染后的细胞与外源性NO供体GSNO作用，样品用生物素转化法检测过表达ASK1的巯基亚硝基化，WB检测ASK1磷酸化(活化)。结果过表达的HEK293细胞给予GSNO处理可以使ASK1发生巯基亚硝基化，同时磷酸化升高；Cys869被鉴定为ASK1亚硝基化位点，将其突变为丙氨酸后，GSNO处理ASK1巯基亚硝基化显著降低，同时抑制了ASK1的磷酸化水平升高。结论外源性NO使ASK1发生巯基亚硝基化，ASK1的巯基亚硝基化能升高其磷酸化水平从而激活ASK1。