五种DNA提取方法对酸奶及菌粉中益生菌DNA提取效果比较

• 作者: 丁卓平 何宇平 杨捷琳 肖其胜
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 酸奶 乳酸菌菌粉 样品前处理 DNA提取 比较 PCR
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 307-311
• 分类号: TS252.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.03.056

摘要

针对酸奶及菌粉样品,比较多种样品前处理条件,包括取样量、菌粉溶剂及溶菌酶孵育时间等,最大程度去除样品中的脂肪、蛋白质及多糖,比较五种DNA提取试剂盒对益生菌DNA的提取效果.提取的DNA经NanoVue Plus测定浓度和纯度,PCR扩增综合评价提取效果.结果显示,酸奶取样量为100 mg时DNA浓度为49.00 ng/μL,A260/A280比值为1.8;采用纯牛奶溶解菌粉更为彻底,0.5 g/mL牛奶溶解菌粉后,提取DNA浓度可达到81.00 ng/μL;溶菌酶最佳孵育时间为1h,增加孵育时间对细菌裂解没有明显帮助.同时,采用五种试剂盒所提取的DNA浓度均在20 ng/μL以上,A260/A280比值大于1.8或接近1.8,其中,Tiangen试剂盒提取的DNA浓度和纯度综合评价优于其他4种试剂盒.结果表明,实验建立的前处理方法能够有效的去除酸奶及菌粉中的脂肪、蛋白质及多糖,提高DNA提取的浓度及纯度;采用的五种商品化试剂盒均能用于酸奶和菌粉中益生菌DNA快速提取,在步骤、得率及纯度上各有差异,应按照不同的实验要求进行选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁卓平	上海海洋大学食品学院	52	471	13.0	19.0
2	杨捷琳		33	146	7.0	10.0
3	何宇平		30	78	6.0	7.0
4	肖其胜		2	8	2.0	2.0